在《马里奥vs大金刚2》中玩家将饰演作为玩具工厂负责人的马里奥,想方设法将始终的死敌大金刚所偷走的迷你型马里奥公仔找回家。本游戏的种类为益智类姿势游戏,游戏中每一个全球共分成四大关卡,一为在时间限制内寻找通关的锁匙的寻找关卡,二为取回来被偷走的迷你型马里奥的解救关卡,三为诱发迷你型玛俐欧返回玩具屋的迷你型马里奥关卡,最终则是与大金刚对战的大金刚关卡玩家务必靠马里奥的广告牌弹跳、头上、攀爬等行動,及其运用输送皮带与锤子等游戏道具来提升重重的关。
游戏的关卡以6个全球所组成,包含森林、活火山、加工厂等40个之上的演出舞台,。当玩家全破以后还会继续再次发生难度系数高些的第二轮回及其大量关卡,十分具备趣味性.